佰利莱生物教您选购大鼠ELISA试剂盒后需注意哪些

2.实验
(1)利用干扰实验即可鉴别ELISA试剂盒是否检测目的抗原a. 将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液；b. 37℃孵育15分钟后，代替原试剂盒中的检测抗体；c. 后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物；d. 实验完毕后，检测其标准曲线，如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配，试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原，该试剂盒为假货ELISA试剂盒；e. 如果标准曲线无线性，则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰，影响了其实际试剂盒抗体的检测作用，则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。

(2)如果购买了两盒同一公司的ELISA试剂盒A和B，利用交叉实验即可鉴别ELISA试剂盒是否造假a. 取出购买的试剂盒A的包被板两条；b. 一条包被板加试剂盒A的标准品做标准曲线；c. 另一条包被板加试剂盒B的标准品做标准曲线；d. 后续操作按照试剂盒说明书进行，加检测抗体、酶复合物和底物；e. 实验完毕后，检测两条标准曲线，如果两条标准曲线一致则说明两个ELISA试剂盒检测的同一个指标而非A和B，即该试剂盒为假货ELISA试剂盒；f. 如果两条标准曲线不一致则说明两个ELISA试剂盒检测的不同指标，试剂盒A只能检测A，不能检测B，即该试剂盒为正常的ELISA试剂盒。

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