Cassification
抗体保存温度和条件
抗体的保存方法一般会直接影响抗体的活性和使用效果。在保存得当的情况下,大部分抗体可以存放数月甚至数年,一般情况需严格按照抗体说明书来进行保存。
抗体保存温度和条件:
1、抗体收到后,需在12000rpm离心1~5分钟,再打开管盖进行分装和保存,如果抗体体积不足50 ul,可延长离心时间至 5 分钟,从而确保抗体全部离心下来。
2、 对于多数抗体而言,分装成小等份并冻存于-20℃或-80℃是zui jia选择。腹水形式的产品收到后需立即冻存,因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在置于4℃条件会导致抗体的降解。
分装成小等份可zui大程du减少由冻融造成的损伤,以及从单个试剂瓶中多次吸取而引入的污染。
小等份只需冻融一次,如有剩余,可将剩余物保存于4℃。小等份的量取决于实验人员在实验中通常采用的量。小等份应不小于10μl;等份越小,储液浓度因抗体蒸发及吸附于保存瓶表面而受到的影响越大。
抗体工作液应该当天配制当天用完,在4℃尽量不要超过1天。
3、抗体的运输:一般选择4℃运输,避免了反复冻融对抗体活性的损害;如若选择干冰运输,收到抗体是冰冻的,分装时解冻,会增加一次冻融的过程,所以运输过程中尽量避免干冰运输。
短期保存
大部分抗体收到后4°C短暂保存1-2周,对抗体活性是没有影响的。
如果要长期保存则最好是在-20°C,最关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体;
腹水形式的产品请在收到后立即冻起来,因为该类产品含有大量的蛋白酶,长期在4°C保存会导致抗体的降解。
稀释到工作浓度的抗体,在4°C保存不得超过一天。
高浓度保存的蛋白质更不易降解,理想浓度是1mg/mL或更高。因此,在-些抗体工艺中会加入一些稳定剂(如BSA) 从而尽可能减少抗体结合到容器壁上造成的损失。但不能在偶联抗体(如偶联有荧光染料、酶或生物su)中加入稳定剂,因为蛋白质稳定剂会与抗体竞争,降低偶联效率。